По завершении сбора необходимо перемещение семени в лабораторию для анализа и приготовления спермодоз. Семя должна доставляться в лабораторию в течение 20 минут после окончания сбора.

В целях предотвращения загрязнения обеспечивать четкое разделение на помещения по содержанию хряков и лабораторию. Сама лаборатория должна быть чистой зоной, куда нельзя входить в одежде и обуви, использовавшихся в хрячнике. Мыть и дезинфицировать руки и при необходимости переодеваться в чистую одежду.

Четко обозначить вход в чистую зону, например, повесив на двери табличку «Доступ запрещен» или «Доступ ограничен»

Четко обозначить факт разделения зон, в том числе на полках для обуви: «уличная обувь», «чистая – лабораторная обувь»

 

Анализ и регистрация

Все собранное семя должно анализироваться в лаборатории. Для обеспечения оптимального качества и продуктивности каждого собранного материала выполняется ряд шагов.

Шаг 1 – Анализ семени

  1. Визуальный анализ семени.

Внимательно посмотреть на семя, убедитесь, что она молочно-белого цвета.

Нормальный диапазон цвета семени – от молочно-белого до бледно-желтого (обезжиренное молоко – жирные сливки). Если цвет находится за пределами нормальной шкалы, то образец утилизировать, т.к. он может быть загрязнен кровью или мочой.

Несоответствия и отклонения цвета семени заметны с первого взгляда, они точно указывают на легкое загрязнение

Качественное семя непременно должно быть чистым и иметь молочно-белый цвет, как показано здесь

2. Анализ запаха:

Понюхайте семя. Запах должен быть нейтральным. Если вы чувствуете запах компонентов мочи или другие посторонние запахи, семя необходимо утилизировать.

Загрязнение семени посторонними компонентами будет сразу очевидно по хорошо ощутимому запаху.

3. Микроскопический анализ:

  • Приготовить образец семени на предметном стекле.

Готовить препарат к анализу можно и держа предметное стекло в руках, и поместив его на предметный столик

Поместить каплю семени на предметное стекло может быть непросто. Облегчить задачу и помочь достичь более точного размещения может трубочка, но при этом нужно не допускать попадания воздуха через трубочку
  • Осторожно опустить покровное стекло на предметное стекло и поместить образец под микроскоп на нагретой поверхности.
  • Проверить подвижность сперматозоидов.

Рассмотрев семя под микроскопом, проверить следующее:

  • Морфология (внешний вид) – нормальные сперматозоиды не имеют никаких деформаций, таких как изогнутый хвостик, двойной хвостик, закрученный хвостик, капельки (проксимальные/дистальные) или акросомы.

  • Подвижность (поступательное движение) – есть два способа ее оценки.
    • Визуальная оценка: насчитать в одном из углов образца 10 сперматозоидов, если 7 из 10 будут нормальны, значит, подвижность составляет 70 %, что является минимально допустимым уровнем.
    • Подсчет при помощи систем компьютерного анализа семени, с использованием цифровой камеры для получения данных о сперматозоидах.

4. Численность сперматозоидов

Измеряя оптическую плотность при помощи колориметра или фотометра, определять концентрации спермадоз.

  • Насколько концентрировано семя?
  • Сколько получается сперматозоидов на партию?

Данный метод позволяет оптимизировать количество хряков на ферме и обеспечить большую однородность и равномерность доз.

Шаг 2 – Регистрация партии спермы:

По окончании сбора семени осуществляется запись всех данных, связанных с произведенной партией, с указанием уникального номера партии. Записываются такие данные, как идентификационный номер DanBred, имя хряка, дата и время сбора, объем и результаты анализа.

Семя для чистопородного скрещивания ни в коем случае не должно смешиваться, придерживаясь правила одного хряка. На этикетке дозы должны указываться идентификационный номер или имя хряка, а также порода хряка.

При сборе семени для чистопородного скрещивания не допускайте смешивание семени от нескольких хряков, в емкости должно быть семя только от одного хряка

Спермадоза Yorkshire, с четким указанием породы хряка, номера партии, имени хряка, а также индекса и данных о сборе

Семя для промышленного скрещивания или от терминальных хряков может объединяться/смешиваться в партии. Объединение семени от разных хряков может повышать показатели фертильности. Для достижения хорошего действия на фертильность при объединении спермы использовать материал как минимум от 3 разных хряков. Обращаем внимание, что объединенные партии должны регистрироваться точно так же, как и семя для чистопородного скрещивания.

Семя может объединяться вот в таком контейнере, с указанием на этикетке породы хряка, номера партии и разбавителя

Объединенные спермодозы, с четким указанием породы хряка, номера партии и индивидуальной информации о конкретных признаках и данных о сборе

Разведение концентрированной спермы для использования при искусственном осеменении

После допуска семени к производству выполнять расчет доз исходя из числа сперматозоидов в собранной спермодозе. Целевые показатели: как минимум 2,0 млрд (109) на дозу для терминального скрещивания и 2,1 млрд (109) на дозу для чистопородного скрещивания.

Перед тем как приступать к разбавлению, нужно сделать следующее:

1. Разбавитель смешать с деминерализованной водой в соответствии с приведенными выше расчетами.

2. Нагреть раствор из деминерализованной воды и разбавителя до температуры 30–35 °C на водяной бане. Залить раствор в полиэтиленовый пакет или баночку и поставить его на водяную баню как минимум на один час или до полного растворения разбавителя.

Использование водяной бани позволяет осуществлять медленный нагрев раствора

Нужно контролировать температуру раствора (по инфракрасному термометру). Удостовериться, что вы проверяете температуру именно раствора, а не просто емкости
Факты
Выбор разбавителя определяет срок хранения семени. Например, при использовании LT-Extender и TRIXcell+ срок хранения составит 7 суток – для объединенной семени для терминального скрещивания, и только 3-е суток для чистопородного скрещивания. Срок хранения отсчитывается от дня сбора и смешивания.

3. Извлечь из пластмассовой емкости полиэтиленовый пакет с семенем. Продезинфицированными ножницами срезать уголок полиэтиленового пакета и перелить его содержимое к смеси деминерализованной воды и разбавителя с температурой 35 °C.

4. Взять пробу разбавленного семени и провести контроль качества готового раствора семени для проверки жизнеспособности сперматозоидов.

5. Разлить раствор семени, который будет использоваться при осеменении, по бутылкам/пакетам. Это может выполняться вручную или машинным способом.

Обычно доза для искусственного осеменения составляет 80–85 мл, включая семя, разбавитель и воду.

Спермадоза для внутриматочного осеменения

Semen dose to be used for intra uterine insemination

Обращение и хранение семени

В целях сохранения качества непосредственно после приготовления спермодозы необходимо помещать в надлежащее место для хранения.

  • Для оптимального хранения необходимо наличие холодильника для хранения семени с возможностью непрерывного поддержания температуры воздуха на уровне 16–18 °C.

Холодильник для хранения семени в лаборатории или на ферме. Следите за тем, чтобы спермодозы от одного хряка располагались в шкафу рядом

Климат-бокс, используемый для транспортировки с одной фермы на другую. При этом для перемещения на короткие расстояния будет достаточно изотермического ящика

Помните о том, что на каждом этапе обработки перед помещением на хранение применяются свои требования к температурному режиму.


  • Не допускайте нагрева или охлаждения семени перед использованием.
  • Предохраняйте спермодозы от воздействия прямых солнечных лучей.
  • Спермодозы следует 1–2 раза в сутки переворачивать, т.к. семя внутреннего производства характеризуется более высокой концентрацией сперматозоидов, что может вызывать подавление сперматозоидов.
  • После хранения и перед использованием обеспечивать проверку всех спермадоз на жизнеспособность – проверку, что сперматозоиды живые и продуктивные.

Контрольный список для обеспечения качества используемого семени

При работе с высококачественными биологическими материалами важно обеспечивать качество на каждом этапе работы вплоть до опороса, с тем чтобы ферма могла получить ожидаемые результаты от спермопродукции:

1. Нарушение выработки семени

  • Иногда случаются такие состояния, как вздутие или атрофия яичек. Эти состояния сопряжены с нарушением выработки сперматозоидов.
  • К уменьшению выработки сперматозоидов и в целом к снижению либидо хряка также приводит пониженное потребление корма.
  • Молодые хрячки, как правило, менее фертильны. У хряков моложе 220-ти дней жизни, система выработки сперматозоидов еще развивается.

2. Измененные сперматозоиды

Сперматозоиды у хряка вырабатываются, но большое число сперматозоидов имеют дефекты, что приводит к повторению охоты у самок, т.к. оплодотворения яйцеклеток не происходит.

  • Дефекты могут проявляться в периоды высокой температуры окружающего воздуха (более 3 суток).Дефекты могут наблюдаться у хряков старше 3 лет, у которых растет число измененных сперматозоидов.

3. Острые заболевания и инфекции

Отсутствие фертильности может вызываться такими инфекциями, как репродуктивно-респираторный синдром свиней, лептоспиры и бруцеллезы. К дефектам сперматозоидов, образуемых в тестикулах, может приводить, в частности, повышенная температура тела хряка. Дефекты, обусловленные повышением температуры, могут быть как непреходящими, так и преходящими.

  • Если у хряка температура выше 40 °C, подвижность его сперматозоидов будет снижена, что приведет к пониженным показателям фертильности. В случае повышения у хряка температуры его следует до следующего сбора помещать на карантин приблизительно на два месяца.

На ферме всегда должен быть термометр для контроля температуры тела

Измерение температуры должно быть частью текущего контроля, нормальная температура для хряка – это около 38,4 °C
  • Непосредственно после вакцинации возможно повышение температуры тела, что следует также учитывать при составлении графика вакцинации.
  • В случае если хряк кажется больным, но температура у него не повышена, следует проводить визуальную оценку. Проверять эякулят на предмет наличия признаков каких-либо отклонений – в частности содержания крови, гноя или избытка мочи.

Признаки болезни могут проявляться как пониженная активность, пониженное потребление корма и общая слабость

Внешне низкое качество образцов спермы может проявляться как присутствие крови и/или гноя, загрязняющих цвет спермы – как в кружке справа

4. Чрезмерное использование хряка

Очень важно следовать плану сбора, т.к. это обеспечивает равномерное взятие семени от всех хряков. Чрезмерное использование только одного хряка приводит к уменьшению у него численности сперматозоидов, что вызывает учащение случаев прохолостов.

Число случаев повторений охоты среди осемененных самок – это самый важный клинический признак наличия у хряка проблем с фертильностью. Успешность осеменения оценивается через 21 день после его проведения. Если повторная охота вызвана инфекцией, у свиноматки могут иметь место выделения из вульвы.

 

Среда

Помимо проблем с физическим состоянием самого хряка или экологических проблем, плохое качество семени может также быть обусловлено факторами среды, такими как компоненты корма, качество корма и воды. Следовательно, имеется множество параметров, которыми необходимо грамотно управлять для обеспечения производства в хозяйстве качественного семени.

1. На подвижности и морфологии сперматозоидов может сказываться содержание микотоксинов в корме и/или соломе.

  • Нужно проводить анализ корма и соломы для исключения тех или иных компонентов.
  • Может быть полезно добавлять в корм связыватели микотоксинов, особенно в периоды высокого риска, например, сразу после уборки урожая или при некорректной организации хранения корма.
  • Удалять старый корм из кормушек перед кормлением, т.к. остатки корма могут содержать плесень и другие загрязнители.

2. Из-за недостаточного расхода воды хряки могут пить меньше, что сказывается на выработке и качестве семени. Убедитесь в том, что напор воды составляет как минимум 4 л/мин.

3. При температуре окружающего воздуха свыше 22 °C у хряков повышается температура тела, что приводит к снижению подвижности сперматозоидов.

Регулярно контролируйте настройки температуры, проверяя, чтобы они следовали нужной кривой

Мои заметки для Приготовление спермадоз

Главная страница

КЛИЕНТЫ ИЗВЛЕКАЮТ МАКСИМАЛЬНУЮ ВЫГОДУ ИЗ DANBRED